槲皮素通过双重抑制 Wnt3a/β-Catenin 和 Akt/NF-κB 信号通路诱导 MGMT 胶质母细胞瘤细胞凋亡。
摘要来源：植物医学。 2023 年 9 月；118:154933。 Epub 2023 年 6 月 23 日。PMID：37451151
摘要作者：王万宇、袁晓鹏、穆嘉盛、邹宇恒、徐兰阳、陈嘉丽、朱晓、李标平、曾志云、吴向辉、尹志新、王其瑞文章来源：
王万宇
摘要：背景：手术切除联合放疗和化疗仍然是临床常见的治疗方法多形性胶质母细胞瘤（GBM）的治疗。但由于耐药等因素，治疗效果并不理想。槲皮素是一种能够穿过血脑屏障的植物成分，已在治疗各种实体瘤中显示出有效性。内夫尽管如此，槲皮素在 GBM 治疗中的潜力尚未得到充分探索。
目的：本研究旨在调查其效果槲皮素对MGMTGBM细胞的作用及作用机制。
方法：基于以下研究预测槲皮素治疗胶质瘤的潜在靶点和机制。网络药理学和分子对接。通过CCK8实验、伤口愈合实验、PI/RNase实验测定槲皮素对细胞抑制率、细胞迁移能力、细胞周期阻滞、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）、线粒体超氧化物形成和凋亡的影响。分别进行染色、JC-1 测定、DCFH-DA 测定、MitoSOX 染色和Annexin V-FITC/PI 双染色。通过甲基化特异性聚合酶链反应（MS-PCR）评估 MGMT 启动子的甲基化状态。 DNA损伤通过碱性/中性定量al 彗星测定和 TUNEL 测定。免疫荧光显示 NF-κB 和 MGMT 的细胞内定位和表达。 Western blot检测迁移相关蛋白、基质金属蛋白酶、凋亡相关蛋白、细胞周期蛋白、DNA损伤/修复酶及相关通路蛋白的表达。
结果：网络药理学确定了槲皮素治疗神经胶质瘤的 96 个靶点和潜在分子机制。随后的实验证实了槲皮素联合替莫唑胺（TMZ）对T98G细胞的协同作用。槲皮素显着抑制人 GBM T98G 细胞的生长和迁移，诱导细胞凋亡，并使细胞停滞在 S 期细胞周期。线粒体膜电位的崩溃、ROS 的产生、Bax/Bcl-2 比率的增强以及 cleaved-Caspase 9 和 cleaved-Caspase 3 的增强表明 ROS 介导的线粒体依赖性凋亡的参与槲皮素诱导细胞凋亡过程中的凋亡。此外，槲皮素诱导的细胞凋亡还伴随着强烈的DNA双链断裂（DSB）、γH2AX焦点形成、MGMT启动子甲基化、裂解-PARP增加和MGMT表达减少。槲皮素可能通过双重抑制 Wnt3a/β-Catenin 和 Akt/NF-κB 信号通路来影响关键 DNA 修复酶 MGMT 的表达，从而促进细胞凋亡。使用特定抑制剂抑制 Wnt3a 和 Akt 会阻碍 MGMT 表达。
结论：我们的研究提供了第一个证据表明槲皮素可能诱导通过双重抑制 Wnt3a/β-Catenin 通路和 Akt/NF-κB 信号通路导致 MGMTGBM 细胞凋亡。这些研究结果表明，槲皮素可能成为改善 GBM 治疗的新药，尤其是 MGMT 高表达的 TMZ 耐药 GBM。