小檗碱通过激活 CAL-62 和 BHT-101 甲状腺未分化癌细胞系中的自噬和凋亡来发挥抗肿瘤活性。
摘要来源：药物开发疗法。 2023 年；17：1889-1906。 Epub 2023 年 6 月 26 日。PMID：37397788
摘要作者：石翔哲、赵盛、王艳、王梦瑶、苏素文、吴艳照、熊辰
文章所属单位：史翔哲
摘要：简介：甲状腺未分化癌（ATC）是最致命的甲状腺癌。阿霉素（DOX）是唯一被批准用于治疗未分化甲状腺癌的药物，但由于不可逆的组织毒性，其临床使用受到限制。小檗碱 (BER)，一种异喹啉碱d 提取物已被认为对多种癌症具有抗肿瘤活性。然而，BER 调节 ATC 细胞凋亡和自噬的潜在机制仍不清楚。因此，本研究旨在评估 BER 对人 ATC 细胞系 CAL-62 和 BHT-101 的治疗效果及其潜在机制。此外，我们还评估了 BER 和 DOX 组合在 ATC 细胞中的抗肿瘤作用。
方法：细胞活力通过CCK-8法测定BER处理不同时间后CAL-62和BTH-101的细胞凋亡情况，并通过克隆形成法和流式细胞术分析评估细胞凋亡。采用Western blot法测定凋亡蛋白、自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路的蛋白水平。使用共聚焦荧光显微镜观察 GFP-LC3 质粒在细胞中的自噬。采用流式细胞术检测细胞内ROS。
结果：目前的结果表明，BER 显着抑制 ATC 细胞的生长并诱导细胞凋亡。 BER 处理还显着上调了 ATC 细胞中 LC3B-II 的表达并增加了 GFP-LC3 斑点的数量。 3-甲基腺嘌呤 (3-MA) 对自噬的抑制可抑制 BER 诱导的自噬细胞死亡。此外，BER 还诱导活性氧 (ROS) 的产生。从机制上讲，我们证明了 BER 通过 PI3K/AKT/mTOR 通路调节人 ATC 细胞的自噬和凋亡。此外，BER 和 DOX 协同促进 ATC 细胞的凋亡和自噬。
结论：综上所述，目前的研究结果表明表明BER通过激活ROS并调节PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导细胞凋亡和自噬性细胞死亡。