在小鼠烟曲霉感染的情况下，大蒜素通过调节 ROS/NLRP3 和自噬来减轻炎症。
摘要来源：基因。 2020 年 8 月 8 日；762:145042。 Epub 2020 年 8 月 8 日。PMID：32777529
摘要作者：戴晶晶、陈瑛、蒋峰
文章所属单位：戴晶晶
摘要：目的：具有广谱抗菌活性的大蒜素对烟曲霉和烟曲霉的抑制作用体内外炎症和自噬的调控机制。
方法：根据实验需要配制相应浓度的大蒜素。体外，6孔板每孔加入2ml 5×10μl真菌孢子悬液，并加入不同终浓度的大蒜素（1μl/ml、2.5μl/ml、5μl/ml、添加 10 μl/ml、20 μl/ml、30 μl/ml)。每天用荧光染料SYTO 9（绿色）对真菌孢子进行染色，并通过流式细胞仪检测不同PH下孢子萌发的抑制情况。 RAW264.7 细胞培养并用烟曲霉孢子刺激 3 小时，然后加入大蒜素溶液。然后一些细胞用 ROS 探针（绿色）和 hochest33342（蓝色）染色。通过荧光显微镜观察大蒜素对ROS的影响。另一部分细胞从细胞裂解液中提取蛋白质，并通过Western blotting检测大蒜素对炎症因子和自噬的影响。荧光显微镜观察稳定转染GFP-RFP-LC3的RAW264.7细胞的绿色和红色斑点。在体内，将烟曲霉孢子气管内注射到小鼠体内，然后以5 mg/kg/天的浓度静脉注射大蒜素，连续7天。连续30天记录小鼠的生存状况、肺部真菌负荷和体重d 通过病理检查和免疫组化检测肺部变化。
结果：体外，大蒜素显着抑制孢子萌发。烟曲霉在24小时内以剂量依赖性方式抑制，并且在酸性环境下对烟曲霉孢子萌发具有稳定的抑制作用。细胞实验表明，大蒜素通过抑制ROS产生、炎症和自噬来抑制细胞内孢子萌发。动物实验中，注射大蒜素组的存活率和体重均高于未注射组，而肺孢子负荷低于未注射组（P < 0.05）。
结论：这些结果支持大蒜素减少炎症和对烟曲霉感染的自噬抵抗，它还为曲霉菌感染性疾病提供了可能的治疗方法，即早期抗炎抗生素或抑制过度自噬的药物。