枸杞多糖通过PPARγ/MAPK/NF-κB通路减轻LPS诱导的牛乳腺上皮细胞炎症反应。
摘要来源：J Anim Sci. 2021 年 11 月 16 日。Epub 2021 年 11 月 16 日。PMID：34791267
摘要作者：徐天乐、刘润、陆旭斌、吴新月、 Petr Heneberg, 毛永江, 蒋前明, Juan Loor, 杨章平
文章来源：徐天乐
摘要：作为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分，脂多糖（ LPS）被充分证明是牛乳腺细胞炎症的诱导剂。枸杞多糖 (LBP) 已被用作非反刍动物的益生元，以提高生长性能、免疫能力和抗氧化能力。我们的目的是研究 LBP 对 LPS 刺激的原代牛乳腺上皮促炎症反应的潜在影响l 细胞（bMEC）。从 3 头没有临床疾病的泌乳荷斯坦奶牛的乳腺组织中分离出细胞（产奶量 30.26± 3.1 kg/d；175 ± 6 DIM）。对于实验前处理，bMEC 使用无血清培养基预培养 12 小时。处理如下：用不含 LPS 或 LBP 的培养基预处理 30 小时（CON）； CON 24 小时，然后用 2 μg/mL LPS 攻击 6 小时 (LPS)；用 100 μg/mL 或 300 μg/mL LBP 预处理 24 小时，然后进行 LPS 攻击 (2 μg/mL) 6 小时（LBP(100)+LPS；LBP(300)+LPS）。为了进一步确定 LBP 对免疫调节的影响是否依赖于 PPARγ 激活，使用了浓度为 1 μM 的 PPARγ 抑制剂 GW9662。用100、300和500μg/mL的LBP处理的细胞上调了PPARγ的蛋白丰度，而PGC1α仅在300μg/mL的LBP处理时具有较高的表达。与CON相比，用100和300 μg/mL LBP预处理的细胞具有更高的SCD1和SREBP1蛋白丰度。 EdU 染色d 细胞伤口愈合测定表明，单独使用 LPS 对细胞增殖的负面影响可以通过用 100 和 300 μg/mL 的 LBP 预处理来逆转。 300 μg/mL LBP 预处理可减轻 LPS 刺激诱导的促炎因子和细胞因子（COX-2、NLRP3、TNF-α、IL-1β 和 IL-6）基因和蛋白丰度的上调（降低超过 2 倍） ）。与单独 LPS 攻击相比，LBP 治疗后参与 NF-κB（IκBα 和 p65）和 MAPK（p38、JNK 和 ERK）通路的蛋白质磷酸化下调。此外，GW9662 对 PPARγ 的抑制减弱了 LBP 对 LPS 诱导的磷酸化 p65、COX-2、IL-1β 和 TNF-α 蛋白丰度的保护作用。这些结果表明 LBP 对 LPS 诱导的 bMEC 炎症反应的保护作用是 PPARγ 激活依赖性的。因此，这些知识可能有助于设计干预牛乳腺炎有害影响的策略。