摘要标题：
蟾蜍灵对人红系白血病细胞Wilms瘤1基因甲基化的影响。
摘要来源：中华整合医学杂志。 2017 年 4 月；23(4):288-294。 Epub 2017 年 4 月 1 日。PMID：28364352
摘要作者：王立培、赵艳娜、孙欣、高瑞兰
文章所属单位：王立培
摘要：目的：探讨蟾蜍灵抑制Wilm瘤1基因（WT1）增殖、上调甲基化的作用及其可能
方法：用不同浓度的蟾蜍灵处理 HEL 细胞，观察细胞形态、增殖测定和细胞周期。逆转录聚合酶检测WT1 mRNA和蛋白表达水平链式反应（RT-PCR）、Western blot和免疫细胞化学，分别通过甲基化特异性PCR和Western blot分析WT1的DNA甲基化以及DNA甲基转移酶3a（DNMT3a）和DNMT3b的蛋白表达水平。
结果：蟾蜍灵能够以剂量依赖性方式有效抑制 HEL 细胞的增殖，抑制率从23.4%±2.1%到87.2%±5.4%，半数抑制浓度（IC50）为0.046 μmol/L。在蟾蜍灵处理的 HEL 细胞中观察到典型的凋亡形态。细胞周期增殖指数由76.4%±1.9%下降至49.7%±1.3%。随着蟾蜍灵剂量的增加，WT1 mRNA及其蛋白的表达水平逐渐降低，同时WT1基因的甲基化状态由未甲基化变为部分或完全甲基化。同时，蟾蜍灵处理后DNMT3a和DNMT3b蛋白的表达水平逐渐增加，且呈剂量依赖性。
结论：蟾蜍灵不仅能显着抑制HEL细胞的增殖，还能使细胞周期阻滞在G0/G1期期，还可诱导细胞凋亡并下调 WT1 的表达水平。我们的研究结果为蟾蜍灵抗白血病提供了证据，其机制可能与提高红系白血病HEL细胞中WT1甲基化状态有关，而WT1甲基化状态与DNMT3a和DNMT3b蛋白上调有关。