[去甲斑蝥素对人胆囊癌血管生成的影响及其抗血管生成机制]。
摘要来源：中华医学杂志。 2006 年 3 月 14 日；86(10):693-9。 PMID：16681930
摘要作者：范月祖、陈春秋、赵泽明、孙伟
文章所属单位：外科同济大学同济医院，上海 200065 [电子邮件受保护]
摘要：目标：调查去甲斑蝥素的作用（NCTD）对人胆囊癌血管生成及其抗血管生成机制的影响。方法：培养人胆囊癌细胞GBC-SD株。 BALB/c裸鼠皮下接种GBC-SD细胞，然后随机分为6组：NCTD组腹腔注射NCTD LD(50)的1/5，每周两次，持续6周； 5-氟尿嘧啶（5-FU）组，腹腔注射1/5 LD（50）的5-FU，每周2次，持续6周；内皮抑素（ES）组，腹腔注射ES； NCTD+5-FU组，腹腔注射NCTD LD(50)的1/5和5-FU LD(50)的1/5，每周2次，共6周； NCTD+ES组，腹腔注射NCTD+ES LD(50)的1/5，每周2次，连续6周；和生理盐水（NS）组（对照组），注射NS。第7周处死小鼠。取出肿瘤来测量其体积并进行显微镜检查。采用免疫组化SABC法测定微血管密度（MVD）及血管生成相关因子：增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素（Ang）-2、血小板反应蛋白（血小板反应蛋白）的蛋白表达量。 TSP）和金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）（2）。制备单个肿瘤细胞悬液，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 RT-PCR用于检测PCNA、VEGF、Ang-2、TSP和TIMP2的mRNA表达。结果：（1）NCTD组MVD为4.12±1.4，显着低于5-FU组（15.8±5.9）和对照组（17.6±3.2）（均P<0.01） ），但与 NCTD + 5-FU 组（3.8 +/- 1.7）、ES 组（4.5 +/- 2.1），NCTD + ES 组（2.9 +/- 1.5）（均 P>0.05）。 NCTD处理后的小鼠肿瘤体积明显缩小，PCNA蛋白表达降低，细胞凋亡率升高，PCNA/细胞凋亡比值升高（P<0.05或P<0.01），且MVD与肿瘤体积、MVD与PCNA/细胞凋亡比值显着相关。凋亡率（均P<0.05）。 (2)NCTD组VEGF、Ang-2蛋白表达量均显着低于对照组和5-FU组(均P<0.01),但与t组差异无统计学意义。ES、NCTD + 5-FU 和 NCTD + ES 组； NCTD组TSP、TIMP2蛋白表达量均显着高于对照组和5-FU组（均P<0.01），但与ES、NCTD+5-FU组差异无统计学意义，和 NCTD + ES 组。 MVD与VEGF、Ang-2表达量呈正相关，与TSP、TIMP2表达量呈负相关（均P<0.05）。 (3)与对照组相比,NCTD组肿瘤细胞VEGF、Ang-2 mRNA表达量均显着降低,TIMP2 mRNA表达量显着升高。结论:NCTD下调VEF|GF、Ang-2等血管生成因子的表达,上调TDP、TIMP2等抗血管生成因子的表达,从而抑制肿瘤血管生成,如作为人胆囊癌，并进一步抑制肿瘤的生长。