二氢丹参酮 I 通过靶向 Keap1-Nrf2 信号通路和 Nrf2 抑制胆囊癌生长磷酸化。
摘要来源：植物医学。 2024 年 7 月；129:155661。 Epub 2024 年 4 月 21 日。PMID：38677269
摘要作者：李庄、莫荣亮、龚俊峰、韩林、王文飞、黄大科、徐杰勾、孙彦军、陈硕、韩根成、孙登群
文章所属单位：李壮
摘要：背景：胆囊癌 (GBC) 对人类健康构成重大风险。它的发展受到许多因素的影响，特别是细胞内活性氧（ROS）的稳态。这种稳态是crROS对肿瘤细胞的存活至关重要，ROS的异常调节与许多癌症的发生和进展有关。二氢丹参酮 I (DHT I) 是从丹参中分离出来的一种生物有效成分，通过诱导细胞凋亡而表现出针对多种肿瘤细胞的细胞毒特性。然而，dht I 发挥细胞毒作用的精确分子机制仍不清楚。
目的：探索抗- dht I 对 GBC 的肿瘤影响并阐明潜在的分子机制。
方法： GBC 细胞 NOZ 和 SGC-996 的增殖使用多种测定法进行评估，包括 CCK-8 测定法、集落形成测定法和 EdU 染色。我们还检查了细胞凋亡、细胞周期进程、ROS 水平和线粒体膜电位的变化，以深入研究复杂的分子机制。定量 PCR (qPCR)、免疫进行荧光染色和蛋白质印迹以评估靶基因在mRNA和蛋白质水平上的表达。使用免疫共沉淀检查核因子红细胞 2 相关因子 2 (Nrf2) 和 kelch 样 ECH 相关蛋白 1 (Keap1) 之间的相关性。最后，使用小鼠胆囊癌异种移植模型研究了 dht I 的体内作用。
结果：我们的研究结果表明，dht I 对 GBC 细胞产生细胞毒作用，包括抑制增殖、破坏线粒体膜电位、诱导氧化应激和细胞凋亡。我们的体内研究证实了 dht I 对异种移植裸鼠肿瘤生长的抑制作用。从机制上讲，dht I 主要通过促进 Keap1 介导的 Nrf2 降解和抑制蛋白激酶 C (PKC) 诱导的 Nrf2 磷酸化来靶向 Nrf2。这导致 Nrf2 核易位的抑制并降低其靶基因表达。此外，Nrf2过表达有效抵消了dht I的抗肿瘤作用，而Nrf2敲低则显着增强了dht I对GBC的抑制作用。同时，PKC抑制剂和核输入抑制剂增加了GBC细胞对dht I治疗的敏感性。相反，Nrf2 激活剂、蛋白酶体抑制剂、抗氧化剂和 PKC 激活剂均能拮抗 dht I 诱导的 NOZ 和 SGC-996 细胞凋亡和 ROS 生成。
结论： 我们的研究结果表明，dht I 通过调节Keap1-Nrf2 信号通路和 Nrf2 磷酸化。这些见解为进一步研究 dht I 作为 GBC 治疗的潜在治疗剂提供了强有力的依据。